圣母百花大教堂（意大利語：Basilica di Santa Maria del Fiore），位于意大利佛羅倫薩城中，是天主教佛羅倫薩總教區的主教座堂。教堂建筑群由大教堂、鐘塔與洗禮堂構成，1982年作為佛羅倫薩歷史中心的一部分被列入世界文化遺產。
圣喬凡尼洗禮堂位于大教堂西邊數米，7世紀即已建成，11世紀改建成現今的模樣。為白色八角形羅曼式建筑。佛羅倫薩的孩童均在此受洗，包括但丁、馬基雅弗利等名人。洗禮堂三扇銅門上刻有《舊約》故事的青銅浮雕，其中二扇為吉伯提（Ghiberti）所作，被米開朗基羅贊為“天國之門”。
鐘塔高85米，最初于1334年由大畫家喬托(吉奧陀)設計并監工，因此俗稱“喬托鐘塔(吉奧陀鐘樓)”。屬哥特式建筑，由六層方型結構向上堆疊成柱形，外墻鋪白色大理石，純凈優雅。
大教堂于1296年奠基，1347年秋天爆發黑死病迫使工程中斷。1367年由全民投票決定在教堂中殿十字交叉點上建造直徑43.7米，高52米的八角形圓頂。1418年佛羅倫薩市政府公開征集能夠設計并建造大圓頂的方案。精通羅馬古建筑的工匠菲利波・布魯內列斯基（Filippo Brunelleschi) 勝出，為總建筑師。在建造拱頂時，沒有采用當時流行的“拱鷹架”圓拱木架，而是采用了新穎的“魚刺式”的建造方式，從下往上逐次砌成。大教堂于1436年3月25日，舉行獻堂典禮。百年之后，米開朗基羅在羅馬圣彼得大教堂也建了一座類似的大圓頂，卻自嘆不如：“我可以建一個比它大的圓頂，卻不可能比它的美。”
大穹頂內部為16世紀佛羅倫薩畫家喬爾喬・瓦薩里（Giorgio Vasari）所繪巨幅天頂畫《末日審判》。
中殿北墻上有烏切洛（Paolo Uccello）所繪《喬凡尼・阿古托紀念碑》和為紀念但丁誕辰200年所繪的《但丁與神曲》（1465年）。
